GB5413.17-2010嬰幼兒食品和乳品中泛酸的測定內容是什么?百檢網(wǎng)檢測范圍廣泛，可根據(jù)客戶需求選擇合適的檢測標準及項目安排檢測，全國近千家合作實驗室，CMA/CNAS資質齊全，可就近安排寄樣檢測。今天百檢網(wǎng)就給大家簡單介紹一下GB5413.17-2010嬰幼兒食品和乳品中泛酸的測定標準內容。

1.范圍

本標準規(guī)定了嬰幼兒食品和乳品中泛酸的測定方法。

本標準適用于嬰幼兒食品和乳品中泛酸的測定。

2.規(guī)范性引用文件

本標準中引用的文件對于本標準的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅所注日期的版本適用于本標準。凡是不注日期的引用文件,其*新版本(包括所有的修改單)適用于本標準。

*法 微生物法

3.原理

利用植物乳桿菌( Lactobacillus plantarun)ATCC 8014對泛酸的特異性,在含有泛酸樣品中生長產(chǎn)生的酸度和形成的光密度來測定泛酸的含量。

4.試劑和材料

除非另有規(guī)定,本方法所用試劑均為分析純試劑,水為GB/T 6682規(guī)定的二級水。

4.1 0.9%生理鹽水:9.0g氯化鈉溶解于1000mL水中,分裝于具塞試管中,每管10mL,121℃滅菌15min。每周準備一次。

4.2 泛酸鈣標準品。

4.3 乙酸溶液(0.2mol/L):吸取12mL冰乙酸用水稀釋至1000mL。

4.4 甲苯(C7H8)。

4.5 乙酸鈉溶液(0.2mol/L):溶解16.4g無水乙酸鈉于水中,稀釋至1000mnL。

4.6 菌株:植物乳桿菌(Lactobacillus plantarun)ATCC 8014。

4.7 培養(yǎng)基

4.7.1 乳酸桿菌瓊脂培養(yǎng)基:光解胨15g,酵母浸膏5g,葡萄糖10g,番茄汁100mL,磷酸-氫鉀2g,聚山梨糖單油酸酯1g,瓊脂10g,加蒸餾水至1000mnL,調pH至6.8±0.2(20℃～25℃)。

4.7.2 乳酸桿菌肉湯培養(yǎng)基:光解胨15g,酵母浸膏5g,葡萄糖10g,番茄汁100m,磷酸二氫鉀2g,聚山梨糖單油酸酯1g,加蒸餾水至1000mL,調pH至6.8±0.2(20℃～25℃)。

4.7.3 泛酸測定用培養(yǎng)基:葡萄糖40g,乙酸鈉20g,無維生素酸水解酪蛋白10g,磷酸氫二鉀1g,磷酸二氫鉀1g,L-胱氨酸0.4g,L-色氨酸0.1g,硫酸鎂0.4g,氯化鈉20mg,硫酸亞鐵20mg,硫酸錳20mg,硫酸腺嘌呤20mg,鹽酸鳥嘌呤20mg,尿嘧啶20mg,胡蘿卜素400μg,鹽酸硫胺素200μg,生物素0.8μg,p-氨基苯甲酸200μg,煙酸1mg,鹽酸吡哆醇800μg,聚山梨糖單油酸酯0.1g,加蒸餾水至1000mL,調pH至6.7±0.1(20℃～25℃)。

4.8 Tris緩沖液:稱取24.2g Trizma base于燒杯中,加200mL水溶解。

4.9 鹽酸(0.1mol/L):吸取8.3mL鹽酸,用水稀釋至1000mnL。

4.10 標準溶液

4.10.1 泛酸標準貯備液(40μg/mL):*稱取45mg～55mg泛酸鈣標準品(4.2),溶入500mL蒸餾水中,加10mL乙酸溶液(4.3),加100mL乙酸鈉溶液(4.5),用水稀釋至泛酸鈣*濃度為43.47μg/mL(即泛酸濃度為40μg/mL),加0.5mL甲苯(4.4)貯于2℃～4℃冰箱中,保存期為4個月。

4.10.2 泛酸中間貯備液(1μg/mL):取25mL標準貯備液(4.10.1),加入蒸餾水500mL,乙酸溶液10mL(4.3),乙酸鈉溶液100mL(4.5),再用水稀釋至1L。加0.5mL甲苯(4.4)貯于冰箱中(2℃～4℃),保存期為1個月。

4.10.3 泛酸標準工作液(10ng/mL,5ng/mL):吸兩次5.0mL中間貯備液(4.10.2),分別用水定容至500mL和1000mL,臨用前配制。

5.儀器和設備

5.1 分光光度儀。

5.2 pH計:精度為0.01。

5.3 渦旋振蕩器。

5.4 天平:感量0.1mg。

5.5 生化培養(yǎng)箱:36℃±0.5℃。

5.6 離心機:轉速≥2000轉/分鐘。

6.分析步驟

6.1 測試菌液的制備

6.1.1 把植物乳桿菌( Lactobacillus plantarun)ATCC 8014凍干菌粉轉入乳酸桿菌肉湯培養(yǎng)基(4.7.2)試管中,36℃±1℃培養(yǎng)24h。再轉接至乳酸杄菌瓊脂培養(yǎng)基(4.7.1)試管中,36℃±1℃培養(yǎng)24h

培養(yǎng)好的乳酸桿菌瓊脂培養(yǎng)基(4.7.1)試管的培養(yǎng)物作為貯備菌種。

6.1.2 從貯備菌種培養(yǎng)基上分別轉接到三個乳酸杄菌瓊脂培養(yǎng)基(4.7.1)試管中,放入培養(yǎng)箱中36℃±1℃培養(yǎng)24h。每月轉接一次,作為月接種管貯于冰箱中。每月定期從月接種管中重新接種3個轉接管保存新菌株。

6.1.3 從月接種的培養(yǎng)管中的一支再接種一支乳酸杄菌瓊脂培養(yǎng)基(4.7.1)試管,36℃±1℃培養(yǎng)24h,作為日接種管每日測定用。

6.1.4 從日接種管中接種一管乳酸桿菌肉湯培養(yǎng)基(4.7.2),36℃±1℃培養(yǎng)24h。在無菌條件下離心該培養(yǎng)液10min(2000轉/分鐘),棄去上清液。用10mL生理鹽水(4.1)振蕩洗滌菌體,離心10min(2000轉/分鐘),棄去上清液,用10mL生理鹽水(4.1)振蕩清洗。如前離心操作,棄去上清液。再加10mL生理鹽水(41),混勻。吸1mL該菌懸液于10mL生理鹽水(4.1)中,混勻制成測試菌液。

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